丙酮酸乙酯對(duì)膿毒癥大鼠認(rèn)知功能的改善作用及機(jī)制研究中有哪些突出的特點(diǎn)，實(shí)驗(yàn)的過程是怎樣進(jìn)行推進(jìn)的？這邊關(guān)于這方面的問題，小編為大家進(jìn)行分享一下。

一、膿毒癥模型的制備

采用CLP法制作膿毒癥大鼠模型，按0.3 ml/100 g腹腔注射10%水合氯醛進(jìn)行麻醉后固定消毒手術(shù)區(qū)域，腹中線做一長(zhǎng)約1 cm切口，游離盲腸，避免損傷盲腸系膜血管，于回盲瓣至盲腸末端外約1/3處縫線結(jié)扎盲腸，18號(hào)針頭貫穿2次結(jié)扎后的盲腸，擠壓少許糞便入腹腔(假手術(shù)組則不結(jié)扎及穿刺盲腸)還納腹腔并逐層關(guān)閉腹腔，術(shù)后均皮下給予30 ml/kg 0.9%NaCl液體復(fù)蘇。

二、側(cè)腦室定位注射

膿毒癥模型制備后立即行側(cè)腦室注射，大鼠頭部固定于腦立體定位儀，備皮消毒術(shù)區(qū)，頭頂部正中切口約0.5 cm，暴露前囟、冠狀縫，以前囟為中心，依照大鼠腦室定位圖譜，右側(cè)矢狀縫旁開1.5 mm，前囟點(diǎn)后方向1.1 mm，牙科鉆鉆一直徑約1 mm的圓形骨窗，微量注射器由顱骨表面垂直向下4.5 mm并固定，微量注射泵2 min注射5 μl 0.9%NaCl或濃度0.5 μg/μl的重組HMGB1 5 μl（Chimerigen Laboratories，批號(hào)：CHI-RF-311HMGB1）后用骨蠟填補(bǔ)骨窗，逐層縫合。

三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理

四、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

水迷宮實(shí)驗(yàn)裝置為帶加熱設(shè)備的圓柱形水池（直徑120 cm，高度50 cm）、圓形平臺(tái)（直徑10 cm，高度26 cm），Supermaze采集分析系統(tǒng)。大鼠實(shí)驗(yàn)前先行尋找平臺(tái)實(shí)驗(yàn)篩除缺陷個(gè)體，再行造模處理48 h后行連續(xù)6 d定位航行實(shí)驗(yàn)：隨機(jī)從4個(gè)象限邊緣中點(diǎn)面壁放入，設(shè)定限時(shí)60 s，若60 s內(nèi)找到平臺(tái)并停留3 s則軟件自動(dòng)停止記錄，此時(shí)入水至登上平臺(tái)時(shí)間為逃避潛伏期；若60 s內(nèi)未找到平臺(tái)，則引導(dǎo)至平臺(tái)停留15 s，計(jì)逃避潛伏期為60 s；同時(shí)軟件記錄游泳速度、距離、軌跡和各象限活動(dòng)時(shí)間。定位航行后1 d撤去平臺(tái)進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)，記錄大鼠60 s內(nèi)穿越虛擬平臺(tái)次數(shù)及目標(biāo)象限活動(dòng)百分比。

五、腦水含量測(cè)定

麻醉斷頭冰上取大腦組織4℃PBS洗凈表面血跡并吸除殘余水稱重（濕重），70℃電熱鼓風(fēng)干燥箱處理24 h后稱重（干重），腦水含量=（濕重-干重）/濕重×....。

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